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常用的細胞凋亡檢測方法【大盤點】

細胞凋亡人體內的細胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡則是病理性的，有關細胞死亡過程的研究，已成為生物學、醫(yī)學研究的一個熱點。已知的細胞死亡方式起碼有兩種，即細胞壞死與細胞凋亡(apoptosis)。細胞壞死是早已被認識到的一種細胞死亡方式，而細胞凋亡則是逐漸被認識的一種細胞死亡方式。此圖片來源于網(wǎng)絡細胞凋亡是細胞的一種基本生物學現(xiàn)象，在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著必要的作用。它在生物體的進化、內環(huán)境的穩(wěn)定以及多個系統(tǒng)的發(fā)育中起著重要的作用。細胞凋亡不僅...

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【表觀遺傳】中樞性性早熟研究

中樞性性早熟（CPP）是兒科內分泌的常見疾病，發(fā)病率較高，且逐年增加趨勢明顯。CPP可以導致患者或者家長出現(xiàn)社會、心理問題，而且還可能嚴重損害兒童的終身高。因此，CPP是兒科內分泌醫(yī)生密切關注的疾病之一。CPP發(fā)病原因目前尚不明確，可能是由于某種因素促發(fā)了下丘腦促性腺激素釋放激素（GnRH）神經元，使其提前活化，通過分泌大量的GnRH，進而激活下丘腦-垂體-性腺軸。5-羥色胺（5-HT）最初在血清中發(fā)現(xiàn)，又名血清素，是一種吲哚衍生物，它廣泛存在于哺乳動物中。5-HT由色氨酸代...

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細胞生物學實驗

細胞生物學實驗及其定制化解決方案常用的細胞生物學相關實驗，主要包含：細胞培養(yǎng)、細胞保種、原代細胞分離和培養(yǎng)、細胞增殖檢測（MTT法/CCK8法）、細胞凋亡、細胞周期、細胞遷移、細胞侵襲、流式細胞分選、慢病毒包裝及穩(wěn)轉株篩選、電生理檢測、定制化細胞模型等。原代細胞分離我司可提供細胞培養(yǎng)和原代細胞分離的服務。例如：原代schwann細胞、原代海馬神經元細胞、原代成骨細胞、臍帶間充質干細胞、海綿體平滑肌細胞等。細胞培養(yǎng)與傳代細胞凍存/保種細胞復蘇細胞換液培養(yǎng)細胞傳代培養(yǎng)細胞共培養(yǎng)細...

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細胞低氧培養(yǎng)模型簡介

人的生存離不開氧氣。如果你感覺很長一段時間里整天無精打采、昏昏欲睡，在排除睡眠不足的因素外，那么你有可能是血液中缺氧了。血液除了能在身體內流動，攜帶能量、廢物等，最主要的功能就是攜帶氧氣，這是它的基本功能之一。如果血液缺氧，嚴重時就會導致器官病變，最常見的就是心梗、腦梗等。近年來，低氧(Hypoxic)于生物機體及細胞的生理作用及其分子機制研究越來越受到醫(yī)學科研學者的關注。低氧培養(yǎng)的適用研究領域近30年來與“低氧誘導”相關的文章統(tǒng)計(此項數(shù)據(jù)來源于Pubmed數(shù)據(jù)庫)細胞是生...

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細胞焦亡研究中的檢測指標有哪些？

細胞焦亡是什么？細胞凋亡（Apoptosis）是經典的細胞死亡方式，但隨著研究的不斷深入，很多細胞死亡現(xiàn)象并不能用細胞凋亡來解釋，隨著研究的深入，科學家又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了一些新的細胞死亡新機制。細胞焦亡（Pyroptosis）便是近年來發(fā)現(xiàn)并證實的一種炎癥程序性細胞死亡，其特征為依賴于炎性半胱天冬酶（主要是caspase-1，4，5，11），并伴有大量促炎癥因子的釋放。細胞焦亡可由各種病理刺激引發(fā)，如中風、心臟病發(fā)作、癌癥、感染等。按照激活機制，細胞焦亡可分為Caspase-1依賴...

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如何選擇合適的內參抗體？

如何選擇合適的內參抗體？Tips：在選擇內參抗體時，我們需要遵循幾個原則：1.種屬來源哺乳動物的樣本需要選擇哺乳動物中穩(wěn)定表達的蛋白作為內參，同樣的，植物樣本需要選擇植物中穩(wěn)定表達的蛋白作為內參。2.細胞定位靶標蛋白的細胞定位不同，適合的內參也不同。如全細胞裂解液可選擇beta-actin、beta-tubulin等，膜蛋白一般選擇NaKATPase，核蛋白則選擇LaminB1、HistoneH3等。3.分子量內參蛋白的分子量需要與目標蛋白的分子量有所區(qū)別，否則兩者條帶無法分...

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TUNEL法細胞凋亡檢測假陽性率高怎么破？

TUNEL法基于對細胞DNA損傷的檢測，通?？捎糜跈z測組織切片樣本和細胞樣本，是晚期細胞凋亡檢測中常用的方法。那么對于檢測過程中常見的假陽性率高的現(xiàn)象是如何產生的呢？1.固定操作不當固定液選擇不恰當，固定液濃度過高，固定時間過長，組織切片過厚都會影響固定效果。一般建議選擇含4%多聚甲醛的PBS溶液來固定細胞或組織切片，時間在30min左右。2.基因轉錄水平高基因轉錄活性高的非凋亡細胞會產生假陽性，例如睪丸組織。3.激發(fā)光下長時間照射在強激發(fā)光長時間照射下，高濃度的PI會吸收能...

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原代細胞分離與培養(yǎng)

原代細胞(primarycell)是指從生物體獲取細胞直接培養(yǎng)。通常，把培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。由于細胞剛從活體組織分離出來，因此原代細胞更接近于生物體內的生活狀態(tài)，且生物性狀尚未發(fā)生很大改變。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段，同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。原代細胞的分離與培養(yǎng)常用的原代細胞培養(yǎng)方法有組織塊培養(yǎng)和分散組織培養(yǎng)。組織塊培養(yǎng)：是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上，加入培養(yǎng)基后進行培養(yǎng)。組織塊培養(yǎng)法是常用的、...

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